• La proteína Ki67 es un importante marcador pronóstico y predictivo en cáncer
  • Hasta ahora la falta de estandarización en la evaluación del biomarcador Ki67 había dificultado su uso en la práctica clínica, un obstáculo que se supera con KiQuant
  • La nueva herramienta emplea una máscara tumoral que permite la selección automática de la región tumoral y reduce la intervención del patólogo
  • Una vez definida el área, un algoritmo cuantifica de forma automática la proporción de las células tumorales Ki67 positivas utilizando para ello una imagen digital creada a partir de dos tinciones inmunohistoquímicas

Barcelona, 23 de julio de 2020.– Aunque desde hace tiempo se sabe que la proteína nuclear Ki67 está relacionada con la proliferación celular en los tumores y por tanto supone un importante marcador pronóstico y predictivo del cáncer, las complejidades para lograr una estandarización en su evaluación habían dificultado su utilización en el entorno clínico. Ahora, KiQuant –una nueva herramienta desarrollada por el Vall d’Hebron Instituto de Oncología (VHIO)– permite mejorar la reproducibilidad de la evaluación del Ki67, automatizando el flujo de trabajo y reduciendo la variabilidad que hasta ahora se producía entre diferentes patólogos al evaluar una misma muestra.

La herramienta se ha probado con pacientes de cáncer de mama y los resultados del estudio acaban de ser publicados en la revista The Breast. Nuestro método es técnicamente factible y potencialmente útil tanto para su uso en el diagnóstico como en el entorno de la investigación, ya que solo requiere de un escáner de laminillas y de un software de análisis de imágenes que hoy están disponibles en muchos departamentos de patología”, apunta Garazi Serna, primera autora del artículo donde se describe esta herramienta.

“KiQuant puede mejorar la estandarización de la evaluación del Ki67 al superar algunos factores que determinan la mala reproducibilidad, fundamentalmente la selección del área de interés y la evaluación manual. Esta estandarización ayudará a aumentar la confianza de los oncólogos hacia su uso en el entorno clínico para las recomendaciones de tratamiento”, añade el Dr. Paolo Nuciforo, coordinador del estudio.

Determinar la proliferación celular
El Ki67 es una proteína nuclear expresada en todas las fases del ciclo celular. Debido a su asociación con la proliferación celular, su detección a través de la inmunohistoquímica se ha convertido en una herramienta útil para evaluar el índice d proliferación de un tumor. “Muchos estudios han demostrado su valor pronóstico y predictivo en una amplia gama de tumores malignos. En particular, en cáncer de mama se ha usado con éxito tanto para clasificación de tumores y evaluación pronóstica como para complementar la información usada en la toma de decisiones terapéuticas en el contexto de enfermedad precoz”, comenta la Dra. Cristina Saura, quien también colaboró en el trabajo proporcionando gran parte de las pacientes que participaron en el estudio.

Sin embargo, a pesar de su utilidad como biomarcador, algunas complejidades técnicas habían dificultado hasta la fecha la extensión de su uso en la práctica clínica. “El principal obstáculo radicaba en que su reproducibilidad no era buena y dependía mucho de la evaluación del patólogo, que es subjetiva y no es cuantitativa”, añade el Dr. Paolo Nuciforo, mientras que la Dra. Cristina Saura añade que “como oncóloga que trata cáncer de mama, la evaluación de Ki67 tiene mucho interés para nosotros, ya que conseguir que esta sea reproducible nos ayudará en la estratificación y el tratamiento de estas pacientes”.

Máscara para la selección del área tumoral y fusión de imágenes
KiQuant supone una metodología novedosa que permite la evaluación automática del Ki67 y la superación de todos estos obstáculos. El uso de una máscara de citoqueratina permite la definición precisa de la región de interés y limita la intervención del patólogo. “Esta era una de las mayores limitaciones que nos encontrábamos hasta ahora para llevar a la práctica clínica el análisis del Ki67 como biomarcador. De esta forma reducimos la variabilidad y ofrecemos una mayor confianza al oncólogo”, explica el Dr. Paolo Nuciforo.

El método, además, permite la reutilización de muestras antiguas y ayuda a preservar el material; algo importante, sobre todo, en algunas muestras escasas de biopsia. “Es algo tan sencillo como hacer una segunda tinción encima de la del Ki67 para seleccionar el tumor. Son muchos años y muchos laboratorios trabajando para conseguir una estandarización, con métodos muchas veces muy complejos, cuando al final era algo tan sencillo que cuando lo descubres te preguntas por qué no se le ocurrió a nadie antes”, comenta Garazi Serna.

Una vez que la máscara de citoqueratina define exactamente el tumor que se ha de evaluar, entra en escena un algoritmo que cuantifica de forma automática el Ki67. Para ello, la información del área de interés reconocido en la tinción de la citoqueratina es traspasado a la imagen del KI67, donde se reconocen y clasifican las células tumorales en positivas o negativas. “Al usar la misma laminilla, nuestro flujo de trabajo supera muchos de los factores que pueden causar que el área reconocida como tumor no lo fuera, como pasa con otros métodos de análisis de imagen que usan cortes seriados. Esto nos permite también almacenar un número menor de laminillas en los archivos de los laboratorios”, añade Garazi Serna, quien comenta cómo de esta forma será posible emplear de manera mucho más extensa el Ki67, tanto en la estratificación de tumores de mama como en el pronóstico y, por tanto, en la toma de decisiones en cuanto a tratamientos a seguir.

“Aunque inicialmente hemos validado la herramienta en cáncer de mama, estamos trabajando para que pueda ser empleada también en otros muchos otros tipo de tumor, ya que el Ki67 es un biomarcador para la mayoría de cánceres”, finaliza Serna.

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Garazi Serna es del Grupo de Oncología Molecular del VHIO.

El Dr. Paolo Nuciforo es el investigador principal del Grupo de Oncología Molecular del VHIO.

La Dra. Cristina Saura es la investigadora principal del Grupo de Cáncer de Mama del VHIO.

Referencia:

Serna, G., Simonetti, S., Fasani, R., Pagliuca, F., Guardia, X., Gallego, P., Jimenez, J., Peg, V., Saura, C., Eppenberger-Castori, S., Ramon y Cajal, S., Terracciano, L., Nuciforo, P. (2020), Sequential immunohistochemistry and virtual image reconstruction using a single slide for quantitative KI67 measurement in breast cancer, The Breast, 53: 102-110. doi:https://doi.org/10.1016/j.breast.2020.07.002